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卵子结构及卵子冷冻保存技术解读

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  (文章转载自「卵子库」卵细胞库)

  冷冻卵子构建卵子库一直是辅助生殖领域的技术研究热点,但是由于卵母细胞体积大、所含水分多、膜的渗透性低,以及冷冻过程中冰晶的形成会对卵子产生损伤,而且纺锤体对温度的敏感,可对染色体的重新排列产生影响,卵细胞冻融复苏率较低,技术进展较为缓慢。

  人类卵细胞形态机构如上图,卵细胞为圆形,直径50~100μm,卵核直径为15~20μm,卵核位于卵细胞中央或稍偏,有的则明显偏心,靠近细胞膜有两个核仁。卵细胞表面有很多微绒毛,在其基部有吞饮小泡。核膜清晰、核孔多,核孔复合物明显。细胞器发达,在核周围是一个没有细胞器。

  慢速冷冻时早期冷冻卵子的方法,需要自动化程序降温仪。至今,世界范围内没有一个统一的卵细胞慢速冷冻方法,但经典的慢速冷冻方法,包括冷冻和解冻两个过程。

  卵子冷冻步骤:1、卵细胞现在不含冷冻保护剂的培养液中室温下平衡5~15min,放入含低浓度保护剂的培养液中作用10min,再移入含有1.0~1.5mol/L冷冻保护剂及0.2mol/L或0.3mol/L蔗糖的培养液中室温下作用10min。2、将卵细胞装入冷冻麦管并放入程序降温仪中,启动仪器。3、以2C/min从室温降至-6C,植冰并在-6C平衡10min。4、以0.3C/min从-6C降至-30C。5、以40C/min从-30C降至-180C后,将麦管投入液氮中冷冻保存。

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